幼时常成一大群活动，成鱼则独游或成对巡行。肉食性，以其他软、硬骨鱼类及头足类、甲壳类等底栖生物为食。具攻击性，对人类具有潜在性危险。性凶猛，食小型鱼类。

路氏双髻鲨繁殖是胎生，妊娠期9-10个月，具卵黄囊胎盘，一次可产下15至31尾幼鲨。刚产仔鲨长42-55厘米。雄鲨性成熟长140-165厘米，雌鲨性成熟长约212厘米，最长达370-420厘米。

双髻鲨并不像大多数鱼和一些其他鲨鱼一样产卵。它们是产育小鲨鱼。每一个受精卵在一个单独的囊内发育。这个囊在母体内，并通过一根带子附着在母体上。里面的卵是一种被叫做卵黄的物质。卵黄为鲨鱼提供生长需要的营养。小鲨鱼在母体内被孵化并继续生长。当它们准备好可以出生时，小鲨鱼就会离开妈妈的身体。
双髻鲨一次可以生大约40个小鲨鱼。小鲨鱼被叫做幼畜。它们是成年双髻鲨的小型翻版。鲨鱼幼仔一出生就可以游泳和自己喂养自己。然而，它们还没有准备好保护自己。并且鲨鱼幼仔不能从它们的父母那里获取保护。幼鲨要独自应付危险，许多鲨鱼幼仔成为了大鲨鱼和深海中其他危险生物的猎物。